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化學(xué)發(fā)光免疫分析的分類及優(yōu)點
發(fā)布時間:2021-05-12 17:01:34

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化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA ) 又稱化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析,是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析方法。化學(xué)發(fā)光免疫分析儀包含兩個部分,即免疫反應(yīng)系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)。化學(xué)發(fā)光免疫分析將高靈敏的化學(xué)發(fā)光技術(shù)與高特異性的免疫反應(yīng)結(jié)合起來建立的微量測定技術(shù),發(fā)展至今已經(jīng)成為一種成熟的、先進的超微量活性物質(zhì)檢測技術(shù),因此該技術(shù)靈敏度高、線性范圍寬、應(yīng)用范圍廣,是可用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術(shù)。

化學(xué)發(fā)光免疫分析儀具有靈敏度高、特異性強、試劑價格低廉、試劑穩(wěn)定且有效期(6-18個月)、方法穩(wěn)定快速、檢測范圍寬、操作簡單自動化程度高等優(yōu)點,被廣大研究人員所認可,并正逐漸替代傳統(tǒng)的生物檢測技術(shù)。

化學(xué)發(fā)光免疫分析儀中核心探測器件為光電倍增管(PMT),由單光子檢測并傳輸至放大器,并加高壓電流放大,放大器將模擬電流轉(zhuǎn)化為數(shù)字電流,數(shù)字電流將發(fā)光信號由R232數(shù)據(jù)線傳輸給電腦并加以計算,得出臨床結(jié)果。

化學(xué)發(fā)光免疫分析按照不同標(biāo)準(zhǔn)可劃分為以下幾種類型:

1、根據(jù)免疫系統(tǒng)的固相載體進行分類,可將化學(xué)發(fā)光分為:

(1)板式化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng),固相載體為微孔板,需要反應(yīng)時間較長;

(2)管式化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng),固相載體為微粒子,比較主流的微粒子是微米級別的超順磁微粒。大多數(shù)管式化學(xué)發(fā)光為大型免疫分析系統(tǒng);

2、根據(jù)免疫反應(yīng)狀態(tài)進行分類,可將化學(xué)發(fā)光分為:

(1)均相化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng):均相條件下反應(yīng)和檢測,無需分離系統(tǒng)。比如科美光激化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)和西門子德靈系統(tǒng);

(2)非均相化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng):主流的化學(xué)發(fā)光系統(tǒng),發(fā)光檢測前,需要將未反應(yīng)結(jié)合的樣品洗脫分離。   

3、根據(jù)發(fā)光體系的不同進行分類,可將化學(xué)發(fā)光分為:化學(xué)發(fā)光免疫分析、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析、電化學(xué)發(fā)光免疫分析法、光激化學(xué)發(fā)光免疫分析。

化學(xué)發(fā)光免疫分析的優(yōu)點:

1.靈敏度高

是其關(guān)鍵的優(yōu)越性,其靈敏度可達10 -16 mol/L。

2.寬的線性動力學(xué)范圍  

發(fā)光強度在4 ~ 6個量級之間與測定物質(zhì)濃度間呈線性關(guān)系。這與顯色的酶免疫分析吸光度( OD 值)為 2.0 的范圍相比,優(yōu)勢明顯。雖然 RIA 也有較寬的線性動力學(xué)范圍,但放射性限制了其應(yīng)用。

3.光信號持續(xù)時間長  

輝光型(glow type )的化學(xué)發(fā)光免疫分析產(chǎn)生的光信號持續(xù)時間可達數(shù)小時甚至一天。簡化了實驗操作及測量。

4.分析方法簡便快速

 絕大多數(shù)分析測定均為僅需加入一種試劑(或復(fù)合試劑)的一步模式。

5.結(jié)果穩(wěn)定、誤差小  

樣品系直接自己發(fā)光,不需要任何光源照射,免除了各種可能因素(光源穩(wěn)定性、光散射、光波選擇器等)給分析帶來的影響,使分析結(jié)果靈敏穩(wěn)定可靠。

6.安全性好及使用期長

免除了使用放射性物質(zhì)。到目前為止,還未發(fā)現(xiàn)其危害性;試劑穩(wěn)定,保存期可達一年。

現(xiàn)如今,化學(xué)發(fā)光項目越來越豐富,在臨床檢驗應(yīng)用更廣泛,覆蓋腫瘤標(biāo)志物、甲狀腺功能、激素、心肌標(biāo)志物、糖尿病、傳染性疾病、貧血等免疫檢測,為更多的臨床科室及科研院所提供完整的檢測方案。


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